神經(jīng)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)原理與技術(shù)

內(nèi)容概要

神經(jīng)生物學(xué)是生命科學(xué)的前沿，是應(yīng)用神經(jīng)解剖學(xué)、神經(jīng)生理學(xué)、神經(jīng)化學(xué)和分子生物學(xué)等多學(xué)科現(xiàn)代技術(shù)，對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)進(jìn)行多層次綜合研究的實(shí)驗(yàn)性科學(xué)。《神經(jīng)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)原理與技術(shù)》(呂國(guó)蔚和李云慶編寫(xiě))作為《生命科學(xué)實(shí)驗(yàn)指南系列》的重要分冊(cè)，遵循理性思維與實(shí)際操作相結(jié)合的原則，全面而系統(tǒng)地介紹了神經(jīng)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)研究的方法學(xué)(第1篇)，并將編著者20余年的有關(guān)科研成果轉(zhuǎn)化為可操作的實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)(第2篇)，以及提供可供參考的有關(guān)實(shí)驗(yàn)研究信息(第3篇)。
《神經(jīng)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)原理與技術(shù)》適合高等醫(yī)學(xué)院校研究生、七年制和五年制醫(yī)學(xué)生及從事神經(jīng)生物學(xué)的研究人員使用，對(duì)于普通高等院校生物系研究生與本科生及生物學(xué)工作者亦有很好的參考價(jià)值。

書(shū)籍目錄

序
前言
1 神經(jīng)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)方法學(xué)
 1.1 科學(xué)思維方法學(xué)
 1.1.1 科學(xué)技術(shù)的歷史動(dòng)力
 1.1.2 辯證地去求索
 1.1.3 辯證地去思考
 1.1.4 辯證地去驗(yàn)證
 1.1.5 辯證地去訓(xùn)練
 1.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方法學(xué)
 1.2.1 選題
 1.2.2 專(zhuān)業(yè)設(shè)計(jì)
 1.2.3 對(duì)照設(shè)計(jì)
 1.2.4 統(tǒng)計(jì)設(shè)計(jì)
 1.3 實(shí)驗(yàn)分析方法學(xué)
 1.3.1 數(shù)據(jù)整理
 1.3.2 統(tǒng)計(jì)分析
 1.3.3 專(zhuān)業(yè)分析
 1.3.4 論文書(shū)寫(xiě)
 1.4 電刺激方法學(xué)
 1.4.1 電刺激的基本原理
 1.4.2 電刺激的物理特性
 1.4.3 神經(jīng)制備的生物特性
 1.4.4 選擇性刺激
 1.4.5 刺激電流擴(kuò)散
 1.5 電記錄方法學(xué)
 1.5.1 容積導(dǎo)體內(nèi)記錄
 1.5.2 誘發(fā)電位記錄
 1.5.3 單單位記錄
 1.5.4 計(jì)算機(jī)輔助的記錄
 1.5.5 細(xì)胞內(nèi)記錄
 1.5.6 膜片鉗記錄
 1.5.7 神經(jīng)纖維速度譜測(cè)定
 1.5.8 軸突分叉點(diǎn)位置測(cè)定
 1.5.9 壓腳痛閾測(cè)定法
 1.6 神經(jīng)化學(xué)方法學(xué)
 1.6.1 組織細(xì)胞破碎法
 1.6.2 突觸體制備
 1.6.3 電泳法
 1.6.4 色譜法
 1.6.5 高效液相色譜法
 1.6.6 微透析技術(shù)
 1.7 化學(xué)神經(jīng)解剖學(xué)方法學(xué)
 1.7.1 免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)
 1.7.2 原位雜交組織化學(xué)技術(shù)
 1.7.3 受體定位技術(shù)
 1.7.4 免疫電子顯微鏡技術(shù)
 1.8 神經(jīng)形態(tài)學(xué)方法學(xué)
 1.8.1 辣根過(guò)氧化物酶示蹤技術(shù)
 1.8.2 熒光素示蹤技術(shù)
 1.8.3 放射性核素示蹤技術(shù)
 1.8.4 順行示蹤技術(shù)
 1.8.5 激光掃描共焦顯微鏡技術(shù)
 1.8.6 定量及分析細(xì)胞學(xué)技術(shù)
 1.9 分子神經(jīng)生物學(xué)方法學(xué)
 1.9.1 核酸分子雜交技術(shù)
 1.9.2 蛋白質(zhì)印跡法
 1.9.3 DNA重組技術(shù)
 1.9.4 聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)
 1.9.5 DNA序列測(cè)定技術(shù)
 1.9.6 mRNA差異顯示技術(shù)
 1.9.7 基因芯片技術(shù)
 1.9.8 轉(zhuǎn)基因動(dòng)物技術(shù)
 1.10 神經(jīng)行為學(xué)實(shí)驗(yàn)方法學(xué)
 1.10.1 行為學(xué)實(shí)驗(yàn)的神經(jīng)基礎(chǔ)及常用動(dòng)物
 1.10.2 常用的高級(jí)腦功能研究方法
 1.10.3 常用痛行為研?方法
 1.11 腦成像
 1.11.1 計(jì)算機(jī)輔助體層攝影
 1.11.2 磁共振成像
 1.11.3 放射性核素?cái)鄬映上?br /> 1.11.4 超聲成像
2 神經(jīng)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)與示教
 2.1 神經(jīng)生理學(xué)實(shí)驗(yàn)
 2.1.1 家兔外周神經(jīng)干復(fù)合動(dòng)作電位記錄
 2.1.2 家兔后肢傳人神經(jīng)纖維速度譜
 2.1.3 擴(kuò)張肛門(mén)對(duì)貓骶?經(jīng)后根放電的影響
 2.1.4 大鼠脊髓節(jié)段性及下行性誘發(fā)電位記錄
 2.1.5 脊髓節(jié)段性缺血時(shí)脊髓誘發(fā)電位的變化
 2.1.6 家兔大腦皮質(zhì)體感誘發(fā)電位記錄
 2.1.7 腦缺血對(duì)家兔大腦皮質(zhì)誘發(fā)電位的變化
 2.1.8 蟾蜍離體脊神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元靜息膜電位與動(dòng)作電位記錄
 2.1.9 大鼠培養(yǎng)腦細(xì)胞膜的電學(xué)特性
 2.1.10 大鼠在體脊神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元?jiǎng)幼麟娢坏募?xì)胞內(nèi)記錄
 2.1.11 貓脊髓背索突觸后神經(jīng)元的細(xì)胞內(nèi)與細(xì)胞外記錄
 2.1.12 貓脊頸束一背索突觸后神經(jīng)元的順、逆向反應(yīng)
 2.1.13 大鼠脊髓背角神經(jīng)元電活動(dòng)的細(xì)胞內(nèi)記錄：
 2.1.14 大鼠脊孤束一背索突觸后神經(jīng)元對(duì)軀體與內(nèi)臟傳人的反應(yīng)
 2.1.15 家兔中縫大核對(duì)外周傳入刺激的反應(yīng)
 2.1.16 家兔丘腦腹后外側(cè)核電活動(dòng)的細(xì)胞外記錄
 2.1.17 軀體內(nèi)臟傳入在脊髓背角的相互作用
 2.1.18 缺氧預(yù)適應(yīng)鼠腦提取液對(duì)ATP敏感性鉀電流的作用
 2.2 神經(jīng)化學(xué)實(shí)驗(yàn)
 2.2.1 缺氧耐受小鼠腦勻漿提取液的抗缺氧作用
 2.2.2 急性重復(fù)缺氧小鼠腦單胺類(lèi)含量的變化。
 2：2.3 不同強(qiáng)度軀體刺激對(duì)家兔腦脊液中□、M□含量的影響
 2.2.4 不同強(qiáng)度軀體刺激對(duì)家兔腦脊液中單胺類(lèi)含量的影響
 2.2.5 兔腦內(nèi)腺苷的微透析法測(cè)定
 2.2.6 缺氧對(duì)小鼠大腦皮質(zhì)突觸體LDH透出率的影響
 2.2.7 低氧預(yù)適應(yīng)小鼠腦勻漿提取液對(duì)PCI2細(xì)胞的保護(hù)效應(yīng)
 2.3 神經(jīng)組織免疫細(xì)胞化學(xué)實(shí)驗(yàn)
 2.3.1
延髓背角和中縫大核內(nèi)的P物質(zhì)樣陽(yáng)性結(jié)構(gòu)——免疫細(xì)胞化學(xué)或免疫熒光細(xì)胞化學(xué)染色法
 2.3.2
大鼠三叉神經(jīng)節(jié)內(nèi)阿片弘受體與降鈣素基因相關(guān)肽共存的陽(yáng)性神經(jīng)元——免疫熒光細(xì)胞化學(xué)雙重?記染色法
 2.3.3
大鼠延髓背角淺層內(nèi)P物質(zhì)樣陽(yáng)性終末與含鈣結(jié)合蛋白神經(jīng)元的聯(lián)系——免疫熒光細(xì)胞化學(xué)雙標(biāo)染色及激光掃描共焦顯微鏡觀察
 2.3.4
面口部注射甲醛溶液后大鼠延髓背角內(nèi)的FOS樣陽(yáng)性神經(jīng)元觀察——免疫細(xì)胞化學(xué)染色法
 2.3.5
大鼠中縫核簇內(nèi)5-羥色胺樣陽(yáng)性神經(jīng)元表達(dá)FOS蛋白——免疫細(xì)胞化學(xué)雙標(biāo)染色法
 2.3.6
大鼠延髓背角內(nèi)向丘腦投射的FOS樣陽(yáng)性神經(jīng)元——逆行標(biāo)記與免疫細(xì)胞化學(xué)雙標(biāo)染色法
 2.3.7
大鼠三叉神經(jīng)節(jié)內(nèi)鈣結(jié)合索mRNA陽(yáng)性神經(jīng)元的分布——放射性核素標(biāo)記的原位雜交組織化學(xué)法
 2.3.8
大鼠中腦導(dǎo)水管周?chē)屹|(zhì)內(nèi)的5-羥色胺樣陽(yáng)性亞微結(jié)構(gòu)——免疫電鏡法
 2.3.9
大鼠孤束核內(nèi)CABA能纖維終末與P物質(zhì)受體樣陽(yáng)性神經(jīng)元的突觸聯(lián)系——包埋前與包埋后免疫電鏡雙標(biāo)記法
 2.3.10
大鼠延髓背角內(nèi)GABA能神經(jīng)元與P物質(zhì)能纖維終末的突觸聯(lián)系——包埋前免疫電鏡雙標(biāo)記法
 2.4 神經(jīng)形態(tài)學(xué)實(shí)驗(yàn)
 2.4.1 大鼠脊髓灰質(zhì)向孤束核的投射
 2.4.2 貓脊髓背角神經(jīng)元向外側(cè)頸核和背索核的分支投射
 2.4.3 大鼠脊孤束-背索突觸后神經(jīng)元的超(亞)微結(jié)構(gòu)
 2.4.4
大鼠脊孤束-背索突觸后神經(jīng)元對(duì)軀體感覺(jué)核與內(nèi)臟感覺(jué)核的分支投射
 2.4.5 大鼠脊髓立體定位磁控過(guò)半夾斷模型
 2.4.6 大鼠臂旁核向杏仁中央核的投射——HRP逆行追蹤方法‘
 2.4.7
大鼠中腦導(dǎo)水管周?chē)屹|(zhì)向伏核的5-羥色胺能投射——HRP逆行追蹤與免疫細(xì)胞化學(xué)染色相結(jié)合的雙標(biāo)記法
 2.4.8
大鼠延髓背角內(nèi)P物質(zhì)受體樣陽(yáng)性神經(jīng)元向丘腦膠狀質(zhì)核投射——熒光素逆行追蹤與免疫熒光染色相結(jié)合的雙標(biāo)記方法
 2.4.9 大鼠中縫大核向脊髓背角和延髓背角的分支投射——熒光素雙標(biāo)記法
 2.4.10
中腦導(dǎo)水管周?chē)屹|(zhì)和中縫背核內(nèi)5-羥色胺能神經(jīng)元的下行分支投射——熒光素雙標(biāo)記與免疫熒光染色相結(jié)合的三標(biāo)記法
 2.4.11
大鼠三叉神經(jīng)脊束核吻側(cè)亞核向三叉神經(jīng)運(yùn)動(dòng)核的投射一植物凝集素(PHA-L)順行示蹤法.-‘
 2.4.12
大鼠延髓背角淺層向臂旁外側(cè)核及丘腦腹后內(nèi)側(cè)核的投射——BDA順行示蹤法
 2.4.13
大鼠中腦導(dǎo)水管周?chē)屹|(zhì)-中縫大核-三叉神經(jīng)感覺(jué)核簇的間接投射——PHA-L順行示蹤與HRP逆行追蹤相結(jié)合的雙標(biāo)記法的光鏡觀察
 2.4.14
大鼠中腦導(dǎo)水管周?chē)屹|(zhì)-中縫大核-三叉神經(jīng)脊束核尾側(cè)亞核的間接投射——PHA-L順行示蹤與ItRP逆行追蹤相結(jié)合的雙標(biāo)記法的電鏡觀察
 2.4.15
大鼠延髓背角向丘腦投射神經(jīng)元與5-羥色胺陽(yáng)性終末的突觸聯(lián)系——HRP逆行追蹤與免疫細(xì)胞化學(xué)染色雙標(biāo)記法
 2.4.16
大鼠孤束核-臂旁核-中央杏仁核的間接投射通路——潰變與}tRP逆行追蹤相結(jié)合的雙標(biāo)記法“
 2.5 分子神經(jīng)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)
 2.5.1 用差異顯示法分離特異表達(dá)的基因片段
 2.5.2 慢性缺氧培養(yǎng)細(xì)胞中缺氧誘導(dǎo)因子-1的提取與檢測(cè)
 2.5.3 大鼠三叉神經(jīng)節(jié)總RNA的提取及cDNA的制備
 2：5.4 5-HT3受體亞型mRNA在大鼠三叉神經(jīng)節(jié)的表達(dá)
 2.5.5 乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶在大鼠紋狀體的表達(dá)及其DNA片段的回收
 2.5.6 乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶DNA片段的亞克隆
 2.5.7 ChAT-pGEM重組質(zhì)粒DNA的制備及限制性酶酶切分析
 2.5.8 ChAT-pGEM重組質(zhì)粒DNA序列的測(cè)定
 2.5.9 乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶表達(dá)蛋白的SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳分析
 2.5.10 乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶在大鼠紋狀體分布的Western印跡檢測(cè)
 2.5.11
性激素對(duì)周?chē)鷤π源碳ふT導(dǎo)脊髓PPDmRNA表達(dá)上調(diào)的影響
 2.5.12
坐骨神經(jīng)部分切斷后初級(jí)感覺(jué)神經(jīng)元(背根節(jié))的差異表達(dá)基因克隆
 2.6 神經(jīng)行為學(xué)實(shí)驗(yàn)
 2.6.1 一足致炎大鼠雙足痛感受性的變化
 2.6.2 甲醛溶液致炎大鼠疼痛行為的觀察
 2.6.3 神經(jīng)反射在一足致炎大鼠非致炎足痛閾變化中的作用
 2.6.4 體液因素在一足致炎大鼠非致炎足痛閾變化中的作用
 2.6.5 急性缺氧預(yù)適應(yīng)對(duì)小鼠缺氧耐受性的影響
 2.6.6 麻醉與興奮小鼠缺氧耐受性的變化
 2.6.7 大鼠脊髓橫斷及半橫斷模型的復(fù)制
 2.6.8 慢性束縛應(yīng)激對(duì)大鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力的影響^
 2.6.9 創(chuàng)傷后應(yīng)激障礙模型大鼠的自發(fā)活動(dòng)和焦慮水平檢測(cè)
3 神經(jīng)生物學(xué)資料
 3.1 神經(jīng)生物學(xué)常見(jiàn)概念
 3.1.1 生物電學(xué)常見(jiàn)概念
 3.1.2 生物化學(xué)常見(jiàn)詞匯
 3.1.3 細(xì)胞培養(yǎng)常見(jiàn)詞匯
 3.1.4 分子生物學(xué)常見(jiàn)詞匯
 3.2 常用的實(shí)驗(yàn)方法
 3.2.1 電生理學(xué)儀器方法
 3.2.2 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的實(shí)施
 3.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物常用數(shù)據(jù)
 3.3.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物常用生理數(shù)據(jù)
 3.3.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物常用麻醉劑與肌肉松弛劑
 3.4 常用試劑、緩沖液、貯存液與酶的配制
 3.4.1 組織培養(yǎng)常用試劑
 3.4.2 電泳緩沖劑
 3.4.3 常用貯存液
 3.4.4 常用酶的配制
 3.5 常用限制性酶識(shí)別序列
 3.6 常用細(xì)胞系、細(xì)胞培養(yǎng)基、抗生素
 3.6.1 細(xì)胞系
 3.6.2 常用培養(yǎng)液成分及配方
 3.6.3 抗生素
 3.7 核酸、蛋白質(zhì)常用數(shù)據(jù)及相對(duì)分子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)參照物
 3.7.1 常用核酸的長(zhǎng)度與相對(duì)分子質(zhì)量
 3.7.2 常用蛋白質(zhì)分子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)參照物
 3.8 赫爾辛基宣言Ⅱ

章節(jié)摘錄

版權(quán)頁(yè)：插圖：第三，科學(xué)技術(shù)之所以會(huì)對(duì)生產(chǎn)力具有如此巨大的推動(dòng)力量，是由于所有科學(xué)技術(shù)本身都具有一種內(nèi)在的自我驅(qū)動(dòng)的動(dòng)力和機(jī)制，是一種“最高意義上的革命力量”。科學(xué)的目的是不斷地發(fā)現(xiàn)新的自然和社會(huì)規(guī)律；技術(shù)的作用在于無(wú)限能動(dòng)地改造和發(fā)展社會(huì)生產(chǎn)?？茖W(xué)技術(shù)只有第一、沒(méi)有第二?？茖W(xué)技術(shù)沒(méi)有永恒的或終極的目的，總是不斷地追求新的目標(biāo)和高峰。從第一件原始工具起，到現(xiàn)代計(jì)算機(jī)的問(wèn)世，科學(xué)技術(shù)幾乎是本能的進(jìn)取，將越來(lái)越廣泛地創(chuàng)造奇跡，極大地增強(qiáng)人們駕馭自然的力量。第四，科學(xué)技術(shù)不僅極大地提高社會(huì)生產(chǎn)力，也必將引起上層建筑的深刻變化。如果說(shuō)，過(guò)去的科學(xué)技術(shù)多少是針對(duì)物質(zhì)世界——人們賴(lài)以生存和發(fā)展的大自然；那么，現(xiàn)代的科學(xué)技術(shù)將在了解和干預(yù)自然的同時(shí)，扎扎實(shí)實(shí)地介入到人的心理、道德、智能等意識(shí)形態(tài)和精神領(lǐng)域?，F(xiàn)代科學(xué)技術(shù)與社會(huì)主義制度的結(jié)合，必將創(chuàng)造出更為高尚的社會(huì)文明，更廣闊地開(kāi)拓人們的視野，更有效地掃除迷信、愚昧和落后?？茖W(xué)技術(shù)不僅興企業(yè)、興農(nóng)業(yè)，還應(yīng)該興教育、興醫(yī)療。通過(guò)科學(xué)振興的教學(xué)和醫(yī)療，又會(huì)反過(guò)來(lái)促進(jìn)科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步與提高。如果說(shuō)“沒(méi)有科學(xué)技術(shù)，企業(yè)就不能生存”，那么“沒(méi)有科學(xué)技術(shù)，教學(xué)和醫(yī)療就不能發(fā)展”。一切有遠(yuǎn)見(jiàn)卓識(shí)的教師、醫(yī)生無(wú)不在努力更新自己的知識(shí)，無(wú)不在努力跟蹤科學(xué)技術(shù)發(fā)展的前沿。名副其實(shí)的高校教師必須具備良好的科學(xué)技術(shù)工作者的素質(zhì)。第五，科學(xué)技術(shù)的發(fā)展不僅影響上層建筑，而且也影響生產(chǎn)關(guān)系。當(dāng)今世界的大事是科學(xué)技術(shù)和科技人才的競(jìng)爭(zhēng)?？茖W(xué)技術(shù)越來(lái)越成為判斷綜合國(guó)力的最重要標(biāo)準(zhǔn)。沒(méi)有科學(xué)技術(shù)，就意味著一個(gè)民族、一個(gè)國(guó)家、一種社會(huì)制度的垮臺(tái)或衰亡。正是基于科學(xué)技術(shù)作為第一生產(chǎn)力對(duì)人類(lèi)社會(huì)生死存亡的強(qiáng)大作用，世界各發(fā)達(dá)國(guó)家，無(wú)不加強(qiáng)對(duì)科學(xué)技術(shù)的國(guó)家干預(yù)，并借以維護(hù)他們的社會(huì)制度。1989年，美國(guó)第101次國(guó)會(huì)破天荒地通過(guò)一項(xiàng)決議，將20世紀(jì)90年代定為“腦的10年”。美國(guó)總統(tǒng)隨即批準(zhǔn)了這個(gè)決議，世界各國(guó)也競(jìng)相響應(yīng)?！澳X的10年”實(shí)際上是以美國(guó)為首的發(fā)達(dá)國(guó)家向21世紀(jì)-_一生物世紀(jì)的進(jìn)軍號(hào)。不難設(shè)想，腦的工作原理一旦被揭示，將決不限于影響人們對(duì)語(yǔ)言、意識(shí)、情緒和思維等本身的理解，而且完全可能從根本上改變?nèi)祟?lèi)社會(huì)的生產(chǎn)面貌。一個(gè)用微電子學(xué)、光電子學(xué)和量子電子學(xué)組裝的人工智能系統(tǒng)，再裝配上按仿生學(xué)原理研制出來(lái)的最敏銳的視、聽(tīng)、嗅、觸等感官以及骨骼和肌肉，這樣的機(jī)器人甚至可以是以納米為單位的極微小的機(jī)器人，將會(huì)使社會(huì)生產(chǎn)和醫(yī)學(xué)診療變得面目一新。第六，歸根結(jié)底，科學(xué)技術(shù)還是要由人來(lái)創(chuàng)造和開(kāi)拓的。當(dāng)代科學(xué)技術(shù)的競(jìng)爭(zhēng)歸根結(jié)底是科技人才的競(jìng)爭(zhēng)。人，歷來(lái)是第一位的。沒(méi)有用現(xiàn)代科學(xué)武裝起來(lái)的人，科學(xué)技術(shù)對(duì)生產(chǎn)力以及生產(chǎn)關(guān)系的影響，就無(wú)從實(shí)現(xiàn)。英國(guó)科學(xué)家赫胥黎在談到法國(guó)科學(xué)家巴斯德時(shí)說(shuō)：“巴斯德一個(gè)人的發(fā)現(xiàn)足以抵償1870年（法國(guó)）付給德國(guó)50億法郎的戰(zhàn)爭(zhēng)賠款?！泵绹?guó)的一位將軍，從軍事的角度談到海森堡時(shí)說(shuō)：“得到海森堡這樣的科學(xué)家足以比得上德國(guó)10個(gè)師的軍隊(duì)?！薄扒к娨椎茫粚㈦y求”，這就是生產(chǎn)力第一要素、勞動(dòng)力或科技人才的巨大物質(zhì)力量。

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