細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)

出版時(shí)間:2010-2  出版社:科學(xué)出版社  作者:桑建利,譚信 主編  頁數(shù):210  

前言

  細(xì)胞是生物體生命活動(dòng)結(jié)構(gòu)和功能的基本單位。細(xì)胞生物學(xué)作為生命科學(xué)的支柱學(xué)科之一,本身是一門實(shí)踐性很強(qiáng)的學(xué)科。細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)的發(fā)展為細(xì)胞生物學(xué)研究的持續(xù)深入提供了重要保證。在當(dāng)今越來越強(qiáng)調(diào)學(xué)生實(shí)踐和動(dòng)手能力的趨勢下,豐富實(shí)驗(yàn)教學(xué),引入新的細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù),對于學(xué)生綜合實(shí)踐能力的培養(yǎng)和提高以及把握當(dāng)今細(xì)胞生物學(xué)發(fā)展脈絡(luò)是非常必要的。細(xì)胞生物學(xué)作為高等院校生物學(xué)教學(xué)體系中的主干課程之一,在加強(qiáng)理論課教學(xué)的同時(shí),實(shí)驗(yàn)教學(xué)的重要性日益突出?! 〖?xì)胞生物學(xué)發(fā)展迅速,新的實(shí)驗(yàn)技術(shù)不斷涌現(xiàn),為了提高教學(xué)水平,需對原有細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行增補(bǔ)和修改。為此,我們結(jié)合北京師范大學(xué)細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課多年教學(xué)經(jīng)驗(yàn)的積累和內(nèi)容的總結(jié),同時(shí)參考其他相關(guān)教材,確定了本書編寫的基本框架與實(shí)驗(yàn)內(nèi)容?! ”緯木帉懺噲D在實(shí)驗(yàn)技術(shù)上具備基礎(chǔ)性、科學(xué)性和先進(jìn)性,并在實(shí)驗(yàn)教學(xué)理念、方法和目的上進(jìn)行一些新的嘗試。書中不僅對實(shí)驗(yàn)過程盡可能具體地描述,還介紹實(shí)驗(yàn)原理與技術(shù)背景,同時(shí)提出教學(xué)建議,力圖從教和學(xué)的各個(gè)環(huán)節(jié)全面統(tǒng)籌安排內(nèi)容。  目前與細(xì)胞生物學(xué)相關(guān)的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容繁多,編寫過程中作者進(jìn)行了認(rèn)真的調(diào)研、比較分析和選擇,力求做到:①內(nèi)容豐富,基本涵蓋全國大部分高校生命科學(xué)相關(guān)專業(yè)所開設(shè)的細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容;②經(jīng)典實(shí)驗(yàn)與現(xiàn)代實(shí)驗(yàn)技術(shù)相結(jié)合,既包括經(jīng)典的、常規(guī)的實(shí)驗(yàn),如DNA的細(xì)胞化學(xué)一Feulgen反應(yīng)、小鼠骨髓染色體的制備等,又有部分現(xiàn)代的細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn),如細(xì)胞mRNA原位雜交技術(shù)、流式細(xì)胞光度術(shù)檢測細(xì)胞周期、卵母細(xì)胞的超排及顯微注射技術(shù)等;③實(shí)驗(yàn)方法可靠,所選擇的實(shí)驗(yàn)技術(shù)已在教學(xué)和科研工作中熟練使用;④保證實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行,書后設(shè)有附錄部分,介紹常用細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)儀器簡要操作程序與維護(hù)、常用細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)試劑與溶液的配制、常用細(xì)胞系或細(xì)胞株等,這將為整個(gè)實(shí)驗(yàn)工作提供很大的幫助。

內(nèi)容概要

本書為細(xì)胞生物學(xué)配套實(shí)驗(yàn)教材,全書包括實(shí)驗(yàn)方法介紹和附錄。所介紹的實(shí)驗(yàn)方法既有經(jīng)典的較為簡單的實(shí)驗(yàn),也有新的較為復(fù)雜的實(shí)驗(yàn),基本涵蓋了目前各高等學(xué)校細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中所涉及的實(shí)驗(yàn),包括顯微鏡基本原理與使用、亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)觀察、染色體制備與分析、細(xì)胞內(nèi)生物大分子的分析、細(xì)胞培養(yǎng)與生長特性分析、細(xì)胞融合與顯微操作技術(shù),共6章39個(gè)實(shí)驗(yàn)。附錄提供了實(shí)驗(yàn)中常用到的相關(guān)參數(shù)與資料,包括常用細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)儀器簡要操作程序與維護(hù)、常用細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)試劑與溶液、顯微鏡鏡頭、濾光片、發(fā)射/激發(fā)譜和常用符號(hào)說明、常用細(xì)胞系或細(xì)胞株等。    本書可供綜合性大學(xué)、農(nóng)林、醫(yī)學(xué)、師范院校相關(guān)專業(yè)本科生和研究生的細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)使用,也可作為相關(guān)研究人員實(shí)驗(yàn)工作的參考書。讀者在使用過程中,可根據(jù)條件和需要對本書內(nèi)容進(jìn)行選擇。

書籍目錄

前言第一章 顯微鏡基本原理與使用 實(shí)驗(yàn)1 普通光學(xué)顯微鏡的基本構(gòu)造和使用方法 實(shí)驗(yàn)2 熒光顯微鏡及其他特殊用途顯微鏡的基本構(gòu)造和使用方法 實(shí)驗(yàn)3 共聚焦顯微鏡基本構(gòu)造和使用方法 實(shí)驗(yàn)4 顯微數(shù)碼技術(shù) 實(shí)驗(yàn)5 石蠟切片的制作及HE染色 實(shí)驗(yàn)6 透射電子顯微鏡工作原理和使用(超薄切片技術(shù))   實(shí)驗(yàn)7 掃描電子顯微鏡工作原理和使用(臨界點(diǎn)干燥技術(shù))  第二章  亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)觀察 實(shí)驗(yàn)8 細(xì)胞核與線粒體的提取與觀察 實(shí)驗(yàn)9 細(xì)胞骨架的觀察 實(shí)驗(yàn)10 葉綠體的分離與觀察 實(shí)驗(yàn)11 細(xì)胞中心體的觀察 實(shí)驗(yàn)12 著絲粒蛋白的間接免疫熒光染色與觀察第三章   染色體制備與分析 實(shí)驗(yàn)13 小鼠骨髓細(xì)胞染色體的制備 實(shí)驗(yàn)14 培養(yǎng)細(xì)胞染色體的制備 實(shí)驗(yàn)15 人外周血淋巴細(xì)胞細(xì)胞分離、培養(yǎng)及染色體標(biāo)本制作   實(shí)驗(yàn)16 染色體G帶染色 實(shí)驗(yàn)17 細(xì)胞核仁組織區(qū)的觀察 實(shí)驗(yàn)18 兩棲類燈刷染色體的制備 實(shí)驗(yàn)19 染色體FISH技術(shù)第四章  細(xì)胞內(nèi)生物大分子的分析 實(shí)驗(yàn)20 DNA的定量測定——Feulgen反應(yīng) 實(shí)驗(yàn)21 細(xì)胞中酸性磷酸酶的定位 實(shí)驗(yàn)22 細(xì)胞中mRNA原位雜交技術(shù) 實(shí)驗(yàn)23 單細(xì)胞電泳技術(shù)第五章 細(xì)胞培養(yǎng)與生長特性分析第六章 細(xì)胞融合與顯微操作技術(shù) 參考文獻(xiàn)附錄圖版

章節(jié)摘錄

  1)顯微鏡的放置  取出顯微鏡時(shí)應(yīng)右手持住鏡臂,左一手托住鏡座,將顯微鏡輕放在左前方的實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,注意輕拿輕放。檢查顯微鏡的各部件是否完整和正常。先確認(rèn)顯微鏡的電源開關(guān)處于關(guān)閉狀態(tài),亮度調(diào)整電位器處于最小,再將電源插頭插入插座,然后打開光源開關(guān),調(diào)節(jié)光強(qiáng)到合適大小.不帶自備光源的顯微鏡以散射日光或室內(nèi)燈光作為光源,不能采用直射陽光。晴天可用近窗的散射光作光源?! ?)調(diào)整光源和光闌  在接通電源或利用反光鏡取得光源后,取下目鏡,直接觀察鏡筒內(nèi)向上射的光線,調(diào)節(jié)聚光鏡上的孔徑光闌,使其孔徑略小于視野,此時(shí)物鏡的數(shù)值孔徑和聚光鏡的數(shù)值孔徑一致,既可充分發(fā)揮該物鏡的分辨力,又能把該物鏡接受范圍之外的多余光擋住,否則這些光線產(chǎn)生的干擾會(huì)影響清晰度。若將孔徑光闌開放過大,超過物鏡的數(shù)值孔徑時(shí),便產(chǎn)生光斑;若收縮孔徑光闌過小,分辨力下降,反差增大。原則上使用不同的物鏡時(shí)應(yīng)相應(yīng)調(diào)節(jié)孔徑光闌使之匹配,但一般只在需細(xì)致觀察標(biāo)本才這樣做,放回目鏡后,通過調(diào)節(jié)聚光器上的視場光闌或調(diào)節(jié)亮度滑鈕或旋鈕,選擇最佳的照明效果?! ?.低倍鏡的使用低倍鏡可將標(biāo)本放大100-200倍,一般用于為高倍鏡或油鏡觀察確定視野。無論最終以多少放大倍數(shù)觀察標(biāo)本,都必須從低倍鏡開始?! ?)放標(biāo)本片  轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)鈕,將鏡筒略升高(或?qū)⑤d物臺(tái)下降),使物鏡與載物臺(tái)距離拉開,留出放置標(biāo)本的空間.取一玻片標(biāo)本放在載物臺(tái)上,注意使載有標(biāo)本(常有蓋玻片)的一面朝上,切不可放反,用標(biāo)本移動(dòng)器彈簧夾夾住,然后轉(zhuǎn)動(dòng)標(biāo)本移動(dòng)器旋鈕,將所要觀察的部位調(diào)到通光孔的正中?;蛴脡浩瑠A夾住,使待觀察的部分居于正中。由于生物樣品在觀察前常要進(jìn)行染色,因此可先用肉眼注意觀察玻片上正常著色的部分,將其放人光路。旋轉(zhuǎn)物鏡轉(zhuǎn)換器(切忌手持物鏡移動(dòng)),將低倍鏡對準(zhǔn)載物臺(tái)中央的通光孔。轉(zhuǎn)到正確位置時(shí)可有轉(zhuǎn)換器被卡進(jìn)位的感覺或聽到碰叩聲。

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